一、范圍

本規范規則了植物急性眼撫慰性或腐蝕性實驗的基本準繩、要求和方法。

本規范適用于化妝品原料及其產品平安性毒理學檢測。

二、實驗目的

確定和評價化妝品原料及其產品對哺乳植物的眼睛能否有撫慰作用或腐蝕作用及其水平。

三、實驗的基本準繩

受試物以一次劑量滴入每只實驗植物的一側眼睛結膜囊內，以未作處置的另一側眼睛作為自身對照。在規則的時間距離內，觀察對植物眼睛的撫慰和腐蝕作用水平并評分，以此評價受試物對眼睛的撫慰作用。觀察期限應能足以評價撫慰效應的可逆性或不可逆性。植物假設在實驗的任何階段出現嚴重抑郁、痛苦的表現，則應該給予人道地處死，依據實驗狀況對受試物停止適當評價。植物如出現角膜穿孔、角膜潰瘍、角膜4分超越48h、缺乏光反射超越72h、結膜潰瘍、壞疽、腐朽等狀況，通常為不可逆損傷的癥狀，也應該給予人道地處死。

四、實驗方法

1、受試物：液體受試物普通不需稀釋，可直接運用原液，染毒量為0.1mL。若受試物為固體或顆粒狀，應將其研磨成細粉狀，染毒量應為體積0.1mL 或重量不大于100mg（染毒量應停止記載）。受試物為強酸或強堿（pH 值≤2 或≥11.5），或已證明對皮膚有腐蝕性或強撫慰性時，可以不再停止眼撫慰性實驗。氣溶膠產品需噴至容器中，搜集其液體再運用。

2、實驗步驟：

悄然拉開家兔一側眼睛的下眼瞼，將受試物0.1mL（100mg）滴入（或涂入）結膜囊中，使上、下眼瞼主動閉合1s，以防止受試物喪失。另一側眼睛不處置作自身對照。滴入受試物后24h內不沖洗眼睛。若以為必要，在24h 時可停止沖洗。

若上述實驗結果顯示受試物有撫慰性，需另選用3只家兔停止沖洗效果實驗，即給家兔眼滴入受試物后30s，用足量、流速較快但又不會惹起植物眼損傷的水流沖洗至少30s。

臨床反省和評分：在滴入受試物后1、24、48、72h 以落第4d 和第7d 對植物眼睛停止反省。假設72h未出現撫慰反響，即可終止實驗。假設發現累及角膜或有其它眼撫慰作用，7d內不恢復者，為確定該損害的可逆性或不可逆性需延伸觀察時間，普通不超越21d，并提供第7d、14d、21d的觀察報告。除了對角膜、虹膜、結膜停止觀察外，其它損害效應均應當記載并報告。可運用縮小鏡、手持裂隙燈、生物顯微鏡或其它適用的儀器設備停止眼撫慰反響反省。在24h觀察和記載完畢之后，對一切植物的眼睛運用熒光素鈉作進一步反省。

對用后沖洗的產品（如洗面奶、發用品、育發沖洗類等）只做30s沖洗實驗，即滴入受試物后，眼閉合1s，至第30s時用足量、流速較快但又不會惹起植物眼損傷的水流沖洗30s，然后停止反省和評分。

對染發劑類產品，只做4s 沖洗實驗，即滴入受試物后，眼閉合1s，至第4s時用足量、流速較快但又不會惹起植物眼損傷的水流沖洗30s，然后停止反省和評分。

五、結果評價

每只植物在每一觀察時點（如染毒1，24，48 和72h）的撫慰反響（建議的表格方式），將實驗條件不沖洗和30秒沖洗或4秒沖洗的結果區分列表；化妝品原料——以給受試物后植物角膜、虹膜或結膜各自在24、48和72h觀察時點的撫慰反響積分的均值和恢復時間評價，按眼撫慰反響分級判定受試物對眼的撫慰強度。

六、實驗結果的解釋

急性眼撫慰性實驗結果從植物外推到人的牢靠性很有限。白色家兔在大少數狀況下對有撫慰性或腐蝕性的物質較人類敏感。若用其它品系植物停止實驗時也失掉相似結果，則會添加從植物外推到人的牢靠性。

來源：檢測效勞

化妝品檢測范圍

清潔類化妝品：洗面奶、卸妝水（乳）、清潔霜（蜜）、面膜、花露水、痱子粉、爽身粉、浴液、洗發液、洗發膏、剃須膏、洗甲液、唇部卸妝液等。

護理類化妝品：護膚膏霜、乳液、化裝水、護發素、發乳、發油/發蠟、焗油膏、護甲水（霜）、指甲硬化劑、潤唇膏等。

美容/修飾類化妝品：粉餅、胭脂、眼影、眼線筆（液）、眉筆、香水、古龍水、定型摩絲/ 發膠、染發劑、燙發劑、睫毛液（膏）、生發劑、脫毛劑、指甲油、唇膏、唇彩、唇線筆等。

檢測目的

微生物目的：菌落總數、霉菌和酵母計數、大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌、軍團菌等。

理化目的：總活性物、鉛、砷、汞等重金屬，甲醇、甲醛、黃曲霉毒素、耐寒、耐熱、磷酸鹽、pH、水分含量等。

毒性實驗：鼠傷寒沙門氏菌/細菌回復突變實驗、急性經口毒性實驗、急性經皮毒性實驗

酶活性檢測：纖維素酶、糖化酶、淀粉酶、蛋白酶、耐熱淀粉酶、超氧化物歧化酶（SOD）等。

平安性檢測：殺菌劑、防腐劑、防霉劑和抗菌劑等。

《化妝品衛生規范2007》

◆重金屬檢測；

◆微生物檢測；

◆防腐劑、性激素、甲醇、甲醛、氫醌、苯酚等有害物質檢測；

◆感官檢測；

我國市場外銷售的化妝品，都需求契合相關的產品規范。世通檢測可依照產品規范停止測試，產品范圍涵蓋護膚、護發、沐浴、洗濯等40多個產品規范。

微生物限制實驗/微生物應戰實驗

出口到歐盟和美國的化妝品必需契合歐盟化妝品指令76/768/EEC和美國聯邦食品、藥品和化妝品法（FDA）在微生物方面的要求，以保證消費者在正常運用下的安康。

化妝品成分剖析

世通檢測化妝品成分剖析測試中心，是專門停止化妝品成分剖析和測試的科研部門，該中心由多名博士和專業人員組成，擁有的儀器包括LC-MS/MS、GC-MS、HPLC、SEM、FTIR等。可協助企業處置技術難題，改良產品配方，應對法規壁壘，提升產品的中心競爭力。

化妝品檢測項目

1、慣例項目：甲醛、甲醇、巰基乙酸、氫醌、苯酚、維生素D2、維生素D3、氨基酸。

2、無機檢測：可溶性鋅鹽、硼酸和硼酸鹽、總氟、鍶、鎘、汞、砷、鉛、pH值、游離氫氧化物。

3、微生物：細菌總數、糞大腸菌群、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌。

4、性激素：雌三醇、己烯雌酚、雌二醇、睪丸酮、甲基睪丸酮、黃體酮。

5、防曬劑：二苯酮、對氨基苯甲酸、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水楊酸乙基己酯。

6、防腐劑：甲基氯異噻唑啉酮、甲基異噻唑啉酮、苯甲醇、苯氧乙醇、苯甲酸，對羥基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯。

7、染發劑中的染料：氨基苯酚、間苯二酚、苯二胺。

8、α-羥基酸：酒石酸、乙醇酸、蘋果酸、乳酸、檸檬酸。

9、去屑劑：水楊酸、酮康唑。

10、抗生素：甲硝唑、二水土霉素、金霉素、土霉素、鹽酸多西環素、氯霉素、鹽酸四環素、鹽酸美滿霉素。

11、防曬化妝品UVB區防曬效果、紫外線吸收劑定性及定量。

13、41種糖皮質激素檢測。

14、過敏源物質檢測。

一、pH 值的測定

（一）、剖析步驟

1. 按說明書調理好儀器。

2. 玻璃電極在運用前應放入純水中浸泡 12h 以上。

3. 將酸度計的電極浸入 25℃與樣品溶液相接近的 pH 值規范緩沖溶液中, 校 正酸度計刻度。

4. 溶液狀樣品可直接取樣測定、膏、霜、粉等固體及半固體樣品按 樣品 加 9ml 純水的比例準確稱取放入 50ml 燒杯中攪拌 5min (必要時可加溫到 40±1℃),使樣品混溶平均 。

5. 測定終了后,將電極沖洗潔凈 ( 10 ) ,其中玻璃電極浸在水中備用。

（二）中華人民共和國有關化妝品 GB、QB、ZBY規范的pH范圍、測定方法、規范號資料供參照執行。

專業規范-（ZBY）

發用冷燙液-卷發劑 GB11428-89

發用冷燙液-走型劑GB11428-89

發乳 GB11429-89

唇膏 GB11430-89

潤膚乳液GB11431-89

洗發液 GB11432-89

護發素 ZBY42003-89

化裝粉餅 ZBY42004-89

染發水ZBY42005-89

染發粉ZBY42005-89

（三）、 制備 pH 規范溶液和樣品的稀釋水應是去離子水, 25℃時電阻率應大于 0.5M·cm,從混合柱去離子器出口直接接取,或煮沸蒸餾水 15min ,冷卻,除 去二氧化碳, pH 升到 6.7 ~ 7.3 的制備水。

（四）、 緩沖溶液運用聚乙烯瓶貯存。商品緩沖溶液經臨時貯存雖未啟開運用, 也能夠有變化。由磷酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽制備的中性到堿性 pH 范圍的緩沖溶 液, 對大氣中的二氧化碳特別敏感,所以應留意密封保管。

二、鎘檢測

1、化妝品中鎘的測定原子吸收法 樣品經預處置,使鎘以離子形狀存在于溶液中,試液中鎘離子被原子化后, 基態原子吸收; 來自鎘空心陰極燈的共振線, 其吸收量與樣品中鎘的含量成正比。在其他條件不變的狀況下, 依據測定被吸收后普賢強度, 與規范系列比擬, 停止 定量。

2、化妝品中鎘的測定-雙硫腙比色法 在堿性溶液中,鎘離子與雙硫腙發生白色絡合物,用氯仿提取后比色定量。

3、 化妝品中鉍測定-鉍化合物作為漂白劑和珠光劑添加在化妝品中。亞硝酸鉍是收斂劑, 對皮膚 有漂白作用。日本化妝品衛生規范規則*允許用量為 3% ,國外資料報導,長 期用含鉍化合物的藥品,對神經系統有反作用。測定方法有二甲酚橙定性法,乙二胺四乙酸二鈉( EDTA-2Na )滴定法、原子 吸收分光光度法。

( 一 ) 二甲酚橙定性法

1. 原理 ：鉍離子和二甲酚橙在酸性條件下一步出現紅紫色。

2. 試劑：0.2% 二甲酚橙溶液:稱取二甲酚橙( xylenolorange) 0.1g 溶于 50%乙醇并稀釋 至 50ml 。

3. 剖析步驟 ：稱取樣品約 25 ~ 30mg 置于 25ml 比色管中, 加 15 ％硝酸 lml 于沸水浴中加熱 2min , 加 10ml 水,冷卻后加 2 滴 0.2 ％二甲酚橙指示劑,如有鉍化合物存在,溶液呈 現紅紫色。

( 二 ) 乙二胺四乙酸二鈉滴定法( EDTA-2Na )鉍和硫脲反響生成黃色絡合物,此絡合物不動搖。用 EDTA-2Na 滴定時,絡 合物中的鉻和 EDTA-2Na 反響生成無色絡合物,黃色消逝即為反響終點。

三、 化妝品中汞的測定

化妝品衛生規范中規則, 汞及汞化合物不可作為化妝品的原料成分， 汞的檢驗方法很多,除已于 1987 年訂為規范檢驗方法 GB7917.1 一 87 的恢復一氧化的冷原子吸收法外,尚有可以快速定性的碘化亞銅法和高溫熱解 - 金汞齊富集 - 冷原子吸收法等。

( 一 ) 碘化亞銅定性法

1. 運用范圍：本方法適于化妝品中汞的快速定性檢驗。其中快速法( 5.1 )適用于不含煤 焦油色素之化妝品中無機汞鹽的檢測, 如因檢樣所含色素使其呈色難于識別時可 運用 5.2 的萃提法。

2 . 原理：化妝品中的無機汞鹽與碘化亞銅構成白色含汞的碘絡合物 Cu 2 HgI 4

(二)催化 - 富集 - 冷原子吸收法

1. 運用范圍 ：本法適用于化妝品中汞的測定。

2. 原理：樣品在外表活性劑作用下經高速散處置, 使油、霜、膏等與水充沛混和并均 分散在制成的樣液中。樣液中的汞在堿性介質中和 Cu 2+ 存在下,被氯化亞錫恢復 為汞原子,與攪擾物質一同被載氣帶入高溫的鈀催化管,消化去除一切的攪擾物 質后,汞由金膜汞富集管捕捉吸收,經釋放后用測汞儀測定。

四、植物實驗（依據《化妝品衛生規范》）

急性經口毒性實驗

急性經皮毒性實驗

急性和屢次皮膚撫慰性/腐蝕性實驗

急性眼撫慰/腐蝕性實驗

皮膚過敏/變態反響實驗

皮膚光毒性實驗

亞慢性經皮毒性實驗

五、植物替代實驗（依據OECD、歐盟和檢驗檢疫行業規范）

3T3中性紅吸收光毒性實驗

急性毒性的角質細胞實驗

急性毒性的3T3細胞實驗

眼撫慰性/腐蝕性的雞胚尿囊膜實驗

胚胎和發育毒性的干細胞實驗

六、順應性和成效項目

人體皮膚斑貼實驗（除臭類/防曬類/祛斑類）

防曬化妝品防曬指數（SPF）測定（人體實驗）

防曬化妝品防曬指數（SPA）測定（人體實驗）

防曬化妝品防水功用測試（人體實驗）

保濕類化妝品成效評價

抗油脂化妝品成效評價

抗皺化妝品成效評價

美白化妝品成效評價

防脫育發產品成效評價

七、防曬劑、防腐劑等添加劑含量檢測

普通化妝品中都含有防腐劑，可用于抑制細菌生長繁衍，防止蛻變，但參與量過大亦會對人體發生撫慰，甚至惹起接觸性皮炎。因此我國化妝品衛生規范對化妝品中防腐劑和防曬劑的種類和運用量均作了限制。

八、甲醛、氫醌、苯酚等有害物質檢測

化妝品中的有害物質主要來自化妝品的化工原料、添加的禁用和超量運用限用的化學物質。

化妝品中添加性激素可促進毛發作長、消弭皺紋、添加皮膚彈性、防止皮膚老化，但臨時運用含激素的化妝品易招致人體代謝紊亂及癌癥的發作。

甲醇作為溶劑添加在香水及噴發膠系列產品中，對中樞神經系統具有清楚的麻醉作用，可惹起腦水腫。對視神經及視網膜有特殊選擇作用，惹起視神經萎縮，招致雙目失明。

氫醌對皮膚有美白作用，普遍用于祛斑漂白類化妝品中，由于其毒性、撫慰性大，輕則招致皮膚瘙癢、過敏、紅斑、灼傷等不良反響。假設大面積臨時運用還將對人體器官、系統發生毒害作用，并引發外源性白斑病、褐黃病和白血病、腫瘤和心血管等疾病。

甲醛具有防腐、殺菌消毒成效，普遍運用于化妝品中。皮膚直接接觸甲醛可惹起過敏性皮炎、色斑、壞死，吸入高濃度甲醛時可誘發支氣管哮喘。