1.取樣：

關(guān)于親水性樣品，直接稱取10g或許量取10mL樣品參與到90mL滅菌生理鹽水中，充沛振蕩平均待檢；關(guān)于疏水性樣品，需先稱取10g樣品研碎或許量取10mL液體樣品，然后參與到10mL滅菌液體石蠟中混勻，再參與10mL滅菌吐溫80，混勻待溶解后，*后參與70mL滅菌生理鹽水混勻后待檢。

2.菌落總數(shù)：

此項(xiàng)目便于判明樣品被污染的水平，是對(duì)樣品停止衛(wèi)生學(xué)總評(píng)價(jià)的綜合依據(jù)。詳細(xì)操作為取上述待檢液2mL，區(qū)分注入兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL，將消融并冷至45℃-50℃的卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培育基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL，隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，待瓊脂凝結(jié)后，翻轉(zhuǎn)平皿，置36℃培育箱內(nèi)培育48h后計(jì)數(shù)。

3.糞大腸菌群：

該菌直接來(lái)自糞便，是重要的衛(wèi)生指示菌。操作方法為取10mL待檢液，參與到10mL雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培育基中，置44℃培育箱中培育24-48h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為糞大腸菌群陰性；如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，劃線接種到伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，置36℃培育18-24h，經(jīng)培育后觀察菌落形狀，如有深紫黑色，圓形，邊緣劃一，外表潤(rùn)滑濕潤(rùn)，具有金屬光澤的菌落或許紫黑色，不帶或略帶金屬關(guān)澤，或粉紫色，中心較深的菌落，應(yīng)進(jìn)一步做革蘭染色鏡檢和靛基質(zhì)實(shí)驗(yàn)，菌落典型，革蘭氏陰性短桿菌，靛基質(zhì)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性則可報(bào)告被檢樣品中檢出糞大腸菌群。

4.銅綠假單胞菌：

該菌對(duì)人有致病力，可使傷處化膿，惹起敗血癥等。檢測(cè)時(shí)將待檢液10mL加到90mLSCDLP液體培育基中，置36℃培育18-24h，如有銅綠假單胞菌生長(zhǎng)，培育液外表多有一層菌膜，培育液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。然后從培育液的薄膜處挑取培育物，劃線接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板上，置36℃培育18-24h ，如出現(xiàn)扁平無(wú)定型，向周邊分散或略有蔓延，外表濕潤(rùn)，呈灰白色，菌落周圍培育基常分散有水溶性色素的菌落時(shí)，進(jìn)一步革蘭染色為革蘭陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。

5.金黃色葡萄球菌：

該菌是葡萄球菌中對(duì)人類致病力*強(qiáng)的一種，能惹起人體局部化膿性病灶，嚴(yán)重時(shí)可招致敗血癥。檢測(cè)方法為取10mL待檢液加到90mLSCDLP液體培育基中，置36℃培育24h，然后劃線接種在Baird Parker氏培育基，置36℃培育48h，如有潤(rùn)滑，凹陷，濕潤(rùn)，直徑為2-4mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈的菌落，經(jīng)革蘭染色鏡檢，證明為革蘭氏陽(yáng)性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇，血漿凝結(jié)酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。

6.霉菌和酵母菌：

該項(xiàng)目用于判明化妝品被霉菌和酵母菌污染水平及其普通衛(wèi)生狀況。檢測(cè)方法為取待檢樣液2mL，區(qū)分注入兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL，將消融并冷至45℃的虎紅培育基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL，隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，待瓊脂凝結(jié)后，翻轉(zhuǎn)平皿，置28℃培育箱內(nèi)培育72h后計(jì)數(shù)。

食品微生物檢驗(yàn)是權(quán)衡食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要目的之一，也是判定被檢食品能否食用的迷信依據(jù)之一。經(jīng)過(guò)食品微生物檢驗(yàn)，可以判別食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生狀況，可以對(duì)食品被細(xì)菌污染的水平作出正確的評(píng)價(jià)，為各項(xiàng)衛(wèi)生管理任務(wù)提供迷信依據(jù)。

常用的食品微生物檢測(cè)有：

1、微生物鑒定系統(tǒng)/藥敏剖析儀

細(xì)菌鑒定藥敏剖析儀適用于對(duì)病原微生物停止種類鑒定和體外抗生素敏感實(shí)驗(yàn)、剖析。

檢測(cè)范圍：菌種庫(kù)2000種以上，可鑒定臨床致病菌550種以上、測(cè)試200種以上藥物的敏理性，做到細(xì)菌鑒定的自動(dòng)化、規(guī)范化和藥物實(shí)驗(yàn)的定量化。

可用于食品平安國(guó)度規(guī)范GB4789系列所要求的食源性致病菌（包括彎曲桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、真菌、非發(fā)酵菌、厭氧菌、副溶血性弧菌、腸桿菌、腸球菌及其它致病菌等）分別鑒定。

2、微生物檢測(cè)儀

微生物檢測(cè)儀普遍運(yùn)用于活菌總數(shù)、大腸菌群、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、綠膿桿菌、沙門氏菌、李斯特菌、糞腸球菌（鏈球菌）、酵母（酵母菌）等微生物的快速檢測(cè)。

便攜一體化，防水抗壓，可隨時(shí)隨地停止檢測(cè)。

3、微生物限制儀

有三聯(lián)微生物限制儀、六聯(lián)微生物限制儀，區(qū)別在于過(guò)濾頭是3個(gè)還是6個(gè)。采用不銹鋼金屬資料制成，配有內(nèi)置隔膜液泵，不需外接抽濾瓶，液體直接經(jīng)過(guò)隔膜液泵掃除，增加了抽濾瓶運(yùn)用上的繁瑣，防止了銜接不好形成抽濾速度慢等缺陷。

4、ATP熒光檢測(cè)儀

ATP含量可以明晰地標(biāo)明樣品中微生物與其他生物剩余的多少，用于判別衛(wèi)生狀況

微生物檢驗(yàn)技術(shù)

1??考點(diǎn)精講課、題庫(kù)、歷年真題